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第三节 抗体检查及配合性试验（第1页）

第三节抗体检查及配合性试验

一、盐水凝集试验

（一）原理

盐水介质凝集试验（aggluti）中的抗原是盐水介质的红细胞悬液，红细胞的抗原决定簇与相应抗体分子上的抗原结合部位结合，交叉连接形成肉眼可见的凝集块。

当抗原阳性红细胞与抗A和抗B血清混匀时，离心后，通常引起直接凝集和（或）溶血，患者血清和献血员细胞盐水悬液混合后立即离心是快速有效的证明ABO不配合的方法。立即离心法的正确操作应是在红细胞悬液加到血清中以后立即离心，尤其是对于ABO血型系统，如果在室温放置2min后离心，可能使3+～4+的凝集减弱为0～1+，并有明显或不明显的溶血；如果在室温放置5min后离心，原来有的凝集可能消失，并有溶血，溶血现象常常被忽视。有的标本在延迟离心后，本应有的凝集会变为既不凝集也不溶血，因而发现不了ABO血型的不配合。有的实验室用EDTA盐水制备红细胞悬液，以消除这种现象。

（二）试剂

⑴生理盐水：0。85%或0。9%（WV）氯化钠。

⑵献血者血清及红细胞，2%～5%生理盐水或EDTA盐水配置的红细胞。

⑶病人血清及红细胞（3天内抽取的标本）。

（三）方法

⑴标记主侧管加入受血者血清2滴加献血者红细胞悬液1滴。

⑵标记次侧管加入献血者血清2滴加受血者红细胞悬液1滴

⑶混匀，以900～1000g离心15～20s。

⑷检查是否溶血，轻轻摇动试管检查凝集。

⑸判断结果。

（四）解释

⑴凝集或溶血为阳性结果（不配合）。

⑵红细胞扣重悬呈均匀的悬液为阴性结果，可接着进行酶法或抗球蛋白法配血试验。

二、间接抗球蛋白试验

（一）原理间接抗球蛋白是检测红细胞体外致敏的方法，在间接抗球蛋白的试验中可以用牛白蛋白法、低离子介质法，聚乙二醇法，凝胶法加快致敏速度，或增强敏感性。

（二）血样

血清和血浆均可使用，血清更优于血浆。

（三）试剂

⑴生理盐水。

⑵牛白蛋白（22%或30%）或Liss溶液：①1。75gNaCl和18g甘氨酸加入1L容器瓶中。

②加入20mlPBS（11。3ml0。15molLKH2PO4与8。7ml0。15molLNa2HPO4混合液）。

③加蒸馏水稀释至刻度。

④用NaOH将pH调至6。7。

⑤加0。5g叠氮钠防腐。

⑶PeG20%（WV）20g3350MWPEG，加Ph7。3PBS至100ml。

⑷抗球蛋白（AHG）试剂。

⑸IgG致敏红细胞。

⑹12*75mm试管。

（四）方法

1。盐水间接抗球蛋白试验

⑴标记主侧管加入受血者血清2滴或3滴加献血者红细胞悬液1滴。

⑵标记次侧管加入献血者血清2滴或3滴加受血者红细胞悬液1滴