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第二节红细胞定型（第1页）

第二节红细胞定型

一、ABO定型

（一）原理根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，以及血清中有无抗A及抗B，可以将血型分为A型、B型、AB型和O型四种，可利用红细胞凝集试验通过正定型、反定型准确鉴定ABO血型。ABO血型的鉴定必须用已知抗A和抗B定型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原和B抗原（正定型），用已知混合的A型红细胞和B型红细胞检测血清中有无相应的抗A和抗B抗体（反定型），这两种试验可以作为相互验证的质量控制方法。

（二）材料

（1）卫生部检验合格的抗A定型试剂。

（2）卫生部检验合格的抗B定型试剂。

（3）抗AB定型试剂。

（4）各种浓度的A型、B型及O型试剂红细胞。

（5）受检者血清。

（6）受检者红细胞盐水悬液或全血。

（三）方法和结果的解释

1。玻片法测定红细胞ABO血型

（1）在标记的玻片上分别加一滴抗A、抗B、抗AB试剂。

（2）各加一滴受检者的红细胞悬液（根据使用说明决定受检者红细胞浓度）。

（3）用干净的加样杆把红细胞悬液和试剂充分混匀，并把混合物均匀涂开，使其覆盖玻片表面大部分。

（4）慢慢连续倾斜玻片2min，不要把玻片放在保温的观察盒上。

（5）观察结果：①凝集为阳性结果。②2min后细胞悬液均匀在玻片上为阴性结果。③对结果有怀疑，应用试管法重新试验。

2。试管法测定红细胞及血清ABO血型

⑴细胞定型：①在1支标记的干净试管中加入1滴抗A试剂。②在1支标记的干净试管中加入1滴抗B试剂。③在1支标记的干净试管中加入1滴抗AB试剂（如果试验需要这个试剂）。④在每个试管中加入1滴2%～5%受检者的红细胞悬液。⑤轻轻混匀，900～1000g离心15～30s。⑥轻轻重悬细胞扣，检查凝集。⑦判读结果，与血清定型结果比较。

⑵血清定型：①标记2支干净的试管A1和B（根据需要可加A2和O细胞）。②每个试管中加2滴受检者血清。③在标记A1的试管中加1滴A1试剂红细胞。④在标记B的试管中加1滴B试剂红细胞。⑤如需要可加A2和O细胞。⑥轻轻混匀试管，900～1000g离心15～30s。⑦检查上清液有无溶血，轻轻重悬细胞扣，检查凝集。⑧判读结果，与细胞定型结果比较。

⑶结果解释：①细胞定型试验的凝集及血清定型试验的凝集或溶血都表示阳性结果。②重悬细胞扣后的均匀的红细胞悬液表示阴性结果。③ABO细胞及血清定型试验的结果和解释见表12～1。④在记录血型结果前要解决细胞和血清定型试验结果不一致的问题。

3。微量板法测定红细胞及血清的ABO血型微量板可以是U型和V型底，固定和可脱卸的。U型板用途更为广泛，可通过离心微量板或是将板放置一定角度观察结果。

⑴细胞定型：①在U型板的两个干净孔内加入1滴抗A、抗B试剂，如需要可在第三孔内加1滴抗AB试剂。②在含有血型定型试剂的各孔内加入1滴2%受检者的红细胞悬液。③轻扣板边，混匀孔内物质。④约200g，离心30～60s。⑤用手轻叩板或借助振**器重悬细胞扣。⑥判读结果，与血清定型结果比较。

⑵血清定型：①每孔内加1滴受检者的血清或血浆。②在U型板的各孔内分别加1滴2%A1和B细胞（如试验需A2或O细胞，可将它们加入第三、四个孔内）。③轻扣板边，混匀孔内物质。④约200g，离心30～60s。⑤用手轻叩板或借助振**器重悬细胞扣。⑥判读结果，与细胞定型结果比较。

⑶结果解释：①细胞定型试验的凝集及血清定型试验的凝集或溶血都表示阳性结果。②重悬细胞扣后的均匀的红细胞悬液表示阴性结果。③ABO细胞及血清定型试验的结果和解释见表12-1。④在记录血型结果前要解决细胞和血清定型试验结果不一致的问题。

4。结果判定见表12-1。

O型红细胞用于抗体筛选试验，抗体筛选是病人和献血者血型检查的一部分。所以所有被检血清都要用O细胞检查，可检出抗H（例如孟买型标本），缗钱样形成，以及检查与血型抗原抗体无关而在血清中存在时能使细胞发生凝集的某些物质。

二、ABO亚型鉴定

ABO抗原的亚型或变异型很多，在A抗原中主要为A1和A2，其他A亚型不多见。而B亚型一般比A亚型更少，区分ABO亚型，可根据：⑴红细胞与抗A、抗A1、抗B及抗AB的凝集程度。

⑵红细胞上的H物质活性的强弱。

⑶血清中是否存在A1。

⑷分泌型人唾液中的A、B、H物质。

（一）A1和A2亚型鉴定

（二）1。原理抗A血清中含有抗A和抗A1两种抗体，抗A可以凝集A型和AB型红细胞，而抗A1只能与部分A型和AB型红细胞反应，据此凡与抗A1反应者被定为A1或A1B型，不与抗A1反应，而与抗A反应者被定为A2或A2B型。

2。试剂

⑴抗A1定型试剂。

⑵受检者2%～5%的红细胞悬液。