笔趣三小说

第二节红细胞定型（第5页）

③如对照玻片上出现凝集，在未进一步试验之前，不能解释为阳性结果。

④玻片边沿附近的干涸不应该混淆为凝集。

2。试管法

⑴盐水法：①在1枝标记的干净试管中加入1滴抗血清。

②在第2支标记的试管中加入1滴合适的对照试剂。

③在每支试管中各加1滴2%～5%受检者红细胞（盐水、血清或血浆）悬液。

④轻轻混合，离心。

⑤轻轻重新悬浮细胞扣，检查凝集。

结果解释：①抗D试管出现2+或2+以上的凝集而对照管呈现均匀悬液，是阳性结果。

②如抗D试管凝集低于2+或1+低于阳性对照，或对照管出现凝集，在未进一步试验之前，不能解释为阳性结果。

③抗D试管和对照试管都是均匀悬液者，是阴性结果。病人的血液可以被解释为Rh阴性，但对献血者必须进一步做变异型D和不完全D型试验，如根据厂家的说明这种抗血清对变异型D和不完全D试验是适用的，那么可以用这支试管37℃适当孵育后进行变异型D和不完全D试验。

⑵酶法：①在标记的干净测试管、阳性对照管，阴性对照管中各加入1滴抗血清。

②测试管中加入2%～5%受检者红细胞悬液1滴，阳性对照加阳性细胞，阴性对照加阴性细胞各1滴。

③各试管中各加1滴1%木瓜酶（或菠萝酶）试剂。

④置37℃，水浴30min。

结果解释：阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，测定管凝集，即表示受检者红细胞上有相应的抗原；不凝集即表示受检者红细胞上没有相应抗原。

⑶抗球蛋白法：①②③同酶法。④大量盐水洗涤细胞3～4次。

⑤最后一次洗涤后，把盐水倾斜干净，吸干试管边缘。

⑥加1～2滴抗球蛋白血清。⑦轻轻混合，离心。⑧轻轻重新悬浮细胞扣，并观察凝集反应。⑨如试管为阴性，加入已知的IgG致敏红细胞并再次离心，以作为抗球蛋白试剂的对照（不一定都需要做），如发生凝集，受检者的阴性试验结果为可靠的。

结果解释：阳性对照凝集，阴性对照不凝集，测定管凝集，即表示受检红细胞上有相应抗原；不凝集，即表示受检者的红细胞上不含有相应的抗原。

3。微量板法

⑴在一个干净的微量板的孔内加1滴Rh试剂，如试剂需要Rh对照，在第二个孔内加1滴对照试剂。

⑵在每一个孔内加1滴2%的红细胞悬液。

⑶轻叩微量板边缘，混匀。

⑷200g离心30～60s。

⑸用手工或借助振**器重悬细胞扣。

⑹判读，解释记录结果。

⑺阴性结果孵育37℃15min。

⑻200g离心30～60s。

⑼用手工或借助振**器重悬细胞扣。

⑽判读，解释，记录结果。

六、Rh阴性确认试验

（一）原理

正常的RhO（D）抗原是有10个外显子决定的至少9个抗原表位组成的嵌合体，如果缺乏或被其他基因错代了一种或一种以上的因子时，称为变异型D和不完全D型。

变异型D和不完全D型红细胞带有D抗原，与大多数抗D试剂在盐水介质和酶试验不发生凝集，但细胞和抗D血清一起孵育后，在间接抗球蛋白试验中均发生凝集。因此，必须进行Rh阴性确认试验，排除变异型D和不完全D型的可能。

（二）试剂

⑴抗D试剂：使用适合进行变异型D和不完全D试验的抗D试剂。不是所有抗D血清都适合于变异型D和不完全D试验，因为有的抗D血清和变异型D和不完全D细胞没有可靠的反应性，有的抗D血清含有抗球蛋白反应的其他抗体。可使用不同厂家或不同批号的抗D血清3～5批进行变异型D和不完全D试验。