笔趣三小说

第二节红细胞定型（第4页）

⑷软肥皂。

⑸乙醚。

⑹2%～5%ABO指示红细胞试剂。

⑺生理盐水。

⑻受检者毛发。

（二）方法

⑴取毛发16cm。

⑵用5%软肥皂浸洗10min，水洗2次。

⑶37℃烘干。

⑷乙醚浸洗1。5h，水洗两次，37℃烘干。

⑸煮沸10min，去除非特异性物质，烘干。

⑹将头发敲扁（宽度可延展至原直径的4倍），切碎备用。

⑺切碎的毛发平分至3个试管中，分别加入3～4滴抗A，抗B，抗H（头发应完全浸没入抗血清中）。

⑻置20℃1h，4℃2h（或过夜）。

⑼完全去除上清液，用4℃盐水洗4次，最后一次洗涤液做平行对照试验，分别加入相应的2%～5%ABO试剂红细胞悬液1滴。

⑽置45～50℃水浴，振摇10min。

⑾900～1000g离心15s。

⑿将试管中的细胞移至载玻片上镜检。

（三）解释

ABO红细胞与最后一次洗涤液不凝集，而与放散液发生相应的凝集，证实毛发上含有相应的血型物质。

五、Rh血型鉴定

（一）原理

Rh血型系统主要有5种抗血清，即抗C，抗c，抗D，抗E，抗e。用5种抗Rh定型血清来检查红细胞抗原，可能有18种表现型。在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定，凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为Rh阴性。其他Rh抗原鉴定和D抗原一样，只是加相应的抗血清即可。其鉴定方法，由抗血清的性质决定，如盐水抗体用盐水法，IgG抗体用酶、抗球蛋白、聚凝胺等方法。

（二）试剂

⑴Rh抗血清：包括多克隆高蛋白质，化学修饰低蛋白质或混合型IgMIgG，单克隆多克隆低蛋白的试剂。

⑵Rh对照试剂（厂家不同对照试剂也不同，可根据厂家的使用说明选择）。

⑶受检者红细胞悬液。

⑷已知Rh阳性和阴性红细胞各1份。

（三）方法

1。玻片试验

⑴在一块标记的干净玻片上加1滴抗血清。

⑵在第二块标记的玻片上加一滴合适的对照试剂。

⑶在每块玻片上加2滴（用自身或血型相合的血清或血浆）混合好的受检者40%～50%细胞悬液。

⑷对每块玻片用一支干净的加样杆把细胞悬液和试剂充分混合，并把混合物均匀涂开，使其覆盖玻片表面大部分。

⑸把两块玻片同时放在观察箱上，慢慢连续倾斜并观察凝集。大多数厂家规定试验必须在2min内判读结果。因为孵育的条件导致混合物的干涸，有可能被误认为是凝集。

⑹解释和记录结果：①抗D血清玻片上出现凝集而对照玻片上是均匀的红细胞悬液时是阳性结果。

②抗D和对照玻片上都是均匀的细胞悬液时，提示结果是阴性。如果要做变异型D和不完全D试验必须用试管采用抗球蛋白法，玻片不能做可靠的变异型D和不完全D试验。