笔趣三小说

第二节红细胞定型（第3页）

⑵900～1000g离心8～10min。

⑶将上清液移入干净试管，煮沸8～10min以灭火唾液酶。

⑷900～1000g离心8～10min，取清亮或微呈乳白色的上清液，将不透明或半固体状的物质丢弃。

⑸几小时内试验，样本需冷藏；几天内试验，样本需～20℃保存，冰冻保存的样品活性可持续几年。

（三）试剂

⑴卫生部检验合格的人源性（多克隆）抗A和抗B定型试剂（单克隆试剂可能造成假抑制）。

⑵抗H：植物凝集素，可以从金雀花种子的盐水浸出液中制备。

⑶多克隆（兔、羊）抗Tea。

⑷A1型B型红细胞。

⑸O型，Le（a+b-）红细胞。

⑹冰冻或新鲜的样品及用作阳性、阴性对照的分泌型、非分泌型者的唾液。

（四）方法

⑴选择血型试剂的稀释度：①倍量稀释抗血清。②在每一稀释度的1滴抗血清中加入1滴相应2%～5%红细胞。③离心。④选择凝集强度为2+最高稀释度的抗血清。

⑵在四只试管中加入1滴最佳稀释度的血型试剂，A，B，H唾液试验分别标明：“分泌型”、“非分泌型”、“盐水”、“测定者”；Lewis唾液试验则标明“Lewis阳性”、“Lewis阴性”、“盐水”“测定者”。

⑶在“分泌型”、“非分泌型”、“测定者”试管中，加入1滴相应的唾液，“盐水”管中加入1滴盐水。

⑷混匀置于室温10min。

⑸加入相应的红细胞1滴。

⑹混匀置于室温30～60min。

⑺离心。

⑻目测结果。

（五）解释

⑴细胞与试管中的抗体发生凝集反应，表明该唾液不含有相应抗原。

⑵细胞与已知抗体不发生凝集反应，表明唾液中含有相应的抗原。

⑶细胞不与唾液对照管的抗体凝集，唾液试验结果无效，这通常表示试剂的稀释度太大，重新选择合适的稀释度做试验。

⑷进一步解释见表12-2。

（六）注意事项

⑴用已知分泌型和非分泌型人的唾液作为试验的对照。对于ABH物质测定，使用以前检验过是Se和sese人的唾液；对于Lewis试验，使用Le（a+b-）或Le（a-b+）表现型的人的红细胞作为阳性对照。阴性对照是Le（a-b-）的红细胞。试剂对照用盐水。

⑵这个试验可以使用唾液的连续盐水稀释法来做血型活性物质的半定量测定，除去已知活性所需要的稀释度愈高，存在于唾液的血型物质就愈多。

⑶一个Lewis阳性的人被证明是A，B和H分泌者，可以假定他的唾液也含有Lea和Leb物质，若Lea阳性者是ABH非分泌型，缺乏Se基因，则在唾液中仅有Lea。

⑷如果唾液在加热前不先离心并除去沉淀，则可以从任何可能存在的细胞释放H物质，使非分泌型导致假阳性。

⑸欲从唾液中得到清晰的不含有粘液的**，可将唾液冰冻保存数天，融化后离心，除去细胞碎屑。

⑹为了防止弱分泌型的漏检，可同时作盐水对照试验，比较两者凝集强度。

四、毛发血型物质的测定

（一）试剂

⑴卫生部检验合格的抗A定型试剂。

⑵卫生部检验合格的抗B定型试剂。

⑶抗H定型试剂。