笔趣三小说

第二节红细胞定型（第2页）

⑶已知A1和A2型2%～5%红细胞悬液。

3。方法

⑴取干净玻片两张，一张供测定受检者红细胞，另一张供对照用，后者标明A1和A2。

⑵将抗A1定型试剂分别滴在受检者玻片和对照玻片的A1和A2部分各一滴。

⑶分别将受检者红细胞悬液以及对照用A1和A2红细胞悬液1滴，滴在上述A1血清上，用玻璃棒将血清和红细胞悬液混匀。

⑷徐徐转动玻片，在室温下反应15min后观察结果。

4。解释你如A1对照红细胞凝集，而A2对照红细胞不凝集，受检者红细胞凝集者为A1，不凝集者为A2。

5。注意事项

⑴检查时必须掌握反应时间。

⑵如A1和A2对照细胞都凝集，表示抗A1血清有问题；如A1和A2对照红细胞都不凝集，可再观察一些时间，如始终不凝集，也证明坑A1血清有问题。

⑶新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜做亚型鉴定。

（三）用吸收和放散法证实其它弱A或弱B亚型

1。原理有弱A或弱B抗原的红细胞不被抗A或抗B所凝集，但可以通过吸收放散方法证实与已知特异性抗体反应的抗原活性物质的存在。

2。试剂

⑴卫生部检验合格的人血清（多克隆）抗A或（和）抗B定型试剂，因为一些单克隆ABO定型试剂，对pH及渗透压的变化敏感，所以不适用于吸收、放散试验。

⑵放散试剂：见放散试验。

3。方法

⑴用盐水至少洗涤1ml受检细胞3次，最后一次洗涤后移除上清液。

⑵在洗涤过的红细胞中加入1ml抗A试剂（如怀疑是弱A变异型）或1ml抗B试剂（如怀疑是弱B变异型）。

⑶充分混匀红细胞和抗血清，把混合物放置4℃1h。

⑷离心混合物，移除上层抗血清。

⑸将红细胞转入一个干净试管。

⑹用大量4℃冷盐水（10ml或更多）至少洗涤红细胞8次，留下最后1次洗涤的小部分洗涤液做游离抗体检测。

⑺使用合适于ABO抗体的放散方法，如热放散，从细胞上可放散出吸收的抗体。具体方法见放散试验。

⑻离心，将上层放散液转入1个干净试管。

⑼检测放散液及最后洗涤液（上述第6步）。

2滴放散液或最后洗涤液加1滴相应细胞，再立即离心，37℃15min及间接抗球蛋白试验后检查凝集状况。如果用的是抗A则用3个不同的A1细胞样本和3个不同的O型细胞;如果用的是抗B则用3个不同的B细胞样本和三个不同的O型细胞。

4。解释

⑴如果：①放散液与3个抗原阳性细胞在各阶段都发生反应；②放散液与3个O型红细胞在各阶段都不发生反应；③最后洗涤液与6个细胞均不起反应。

那么放散液中存在抗A或抗B，则细胞上存在A或B抗原。

⑵如果放散液不与A或B细胞发生反应，那么可能表明细胞上没有抗原表达，不能吸收相关抗体，或是放散液制备失误造成。如果放散液与一些或所有A或B细胞，也与一些或所有O细胞起反应，表明在吸收放散过程中，获得了一些其他的抗体。

⑶如果最后洗涤液与A或B细胞起反应，则认为对放散液做的试验结果是无效的，也可能是放散前未结合的试剂抗体没有充分去除，也可能是细胞没有充分洗涤，还可能是结合的抗体在洗涤过程中分离。

三、A、B、H、Lea和Leb唾液试验

（一）原理

人群中约有78%的人含有Se基因，它能控制分泌可溶性ABH抗原物质，进入体液（脑脊液除外）。抗体能与具有相应抗原的红细胞发生特异性凝集，体液中的可溶性抗原物质能与改抗体发生中和反应，抑制抗体凝集作为指示反应的红细胞。利用血凝抑制方法，把唾液中可溶性A，B，H，Lewis血型物质和相应的抗体中和，然后加入相应细胞，如果这些细胞凝集就表示唾液中不含有相应的可溶性抗原，若是分泌型，唾液中应能证实这些分泌的可溶性抗原。

（二）收集唾液

⑴刷牙或漱口后，收集5～10ml唾液于小烧杯或大口试管中，咀嚼蜡、石蜡、橡皮条能帮助收集唾液，不能咀嚼口香糖或任何其他含糖或蛋白质的东西。