第十章微柱凝胶技术
一、微柱凝胶技术原理
1984年,YvesLapierre和JeanAdam发明了凝胶测试法,1988年,瑞士达亚美公司将这一专利产品推向市场。现国外已作为血型检测与配血的常规使用方法。凝胶技术(gelteique,GT)是用特定的化学物质做成微型凝胶柱,柱的上端为反应室,是一个加试验样本的空间。试验所需的各种抗体,包括抗球蛋白抗体,均已含在相应的凝胶管中,根据需要在相应管中加样本细胞悬液或(和)血清(浆),或试剂细胞悬液,离心,或按说明书要求温育后离心。凝胶柱起过筛作用,红细胞凝集块不能通过凝胶的间隙留在凝胶的上端(部),为阳性反应;未凝集的红细胞通过凝胶的间隙,沉积到胶管的底部,为阴性反应。
二、微柱凝胶技术方法
(1)配制1%红细胞悬液备用;若用抗凝全血配1%红细胞悬液时,稀释液要含有抗凝剂。
(2)按照操作说明,在选用的凝胶管中加入样本红细胞悬液或(和)血清,或试剂红细胞悬液,离心或温育后离心。
(3)按照说明说规定的离心速度和时间确定所用离心机离心半径,用水平离心机离心。
(4)结果判定:①强阳性(4+)结果:凝胶柱的下部没有游离细胞,底部也不能有细胞;②3+阳性结果:底部可有极少量红细胞;③2+和1+阳性结果:底部明显有红细胞,1+时整个柱的下部较为混浊;④阴性结果:底部红细胞扣上部没有游离红细胞。所有反应管的上部有一个反应区,可有少量红细胞。
三、微柱凝胶技术的优点
1)测试结果安全可靠:
对不完全抗体不会漏检,在交叉配血过程中不会出现假阴性结果,可预防因IgG类抗体引起的输血反应。选择已知弱的或变异红细胞样本来评价凝胶血型卡,发现用传统方法检测不到的抗原-抗体反应,用凝胶微柱可清晰地显示出来。
2)不需要洗涤红细胞
3)3结果判断客观性强、准确性高:
阴性、阳性、弱阳性的结果判断都有明确的界定,不依操作者与实验室的不同而变化。大多数传统测试法仍然依赖于对**环境下凝集反应的解释,由于缺乏客观性的反应终点,反应结果的判读准确性因人而易。即使自动化判读机也很难将微弱的血细胞凝集与阴性反应区别开来。
三、微柱凝胶自动加样系统
(一)组成微柱凝胶自动加样系统包括
(二)优点
1、提高检验质量和安全性
a。标准化操作(加样、判读、解释)
b。清晰的资源识别(条形码识别)
c。数据库的自动化管理
d。数据的可追踪性可回顾性
患者住院号
-结果
-日期
-批号
-用过的稀释液试剂
-状况